姜黄素促进大鼠骨髓间充质干细胞的体外增殖及成骨分化

目的:研究姜黄素对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cell,rBMSC)生物学行为的影响.方法:将含不同浓度梯度姜黄素溶液的完全培养基与rBMSC共培养,通过CCK-8法检测细胞增殖情况,确定姜黄素溶液的最适浓度;将rBMSC与4 μg/mL姜黄素共孵育,0 μg/mL姜黄素处理组作为对照,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和活性检测评估其早期成骨分化水平;使用茜素红染色评估成骨分化晚期细胞外基质矿化情况;利用实时荧光定量逆转录PCR检测细胞成骨诱导7、14 d时成骨指标骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein-2,Bmp2)、核心结合因子α1(core binding fac-tor alphal α1,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,Ocn)、骨桥蛋白(osteopontin,Opn)、成骨细胞特异基因(osterix,Osx)的表达.结果:CCK-8结果显示含不同浓度姜黄素溶液的培养基中的rBMSC均能持续增殖,4μg/mL姜黄素组对rBMSC增殖的促进作用最为显著(与对照组相比,P ＜ 0.001);ALP活性检测及染色结果显示姜黄素组细胞的ALP活性高于对照组(P ＜ 0.001);茜素红染色结果显示姜黄素组的细胞外基质矿化水平高于对照组;实时荧光定量逆转录PCR结果显示姜黄素组细胞的相关成骨基因Bmp2、Runx2、Ocn、Opn、Osx的表达均高于对照组(P＜0.05).结论:姜黄素能够促进rBMSC的体外增殖及成骨分化.