血流感染碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的耐药分析及同源性研究

本研究旨在探讨血流感染碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKP)的耐药特点、分子分型特征和菌株同源性,为CRKP感染的临床诊治和预防控制提供理论参考.收集2015年4月至2018年3月期间就诊于上海市某三甲医院患者血标本分离的肺炎克雷伯菌(KP)非重复菌株,采用VITEK2 Compact全自动细菌鉴定仪鉴定细菌并进行药物敏感性试验,共获得51株CRKP.对CRKP菌株使用纸片扩散法或琼脂稀释法进行15种抗菌药物的敏感性试验;采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测碳青霉烯酶基因型;通过脉冲场凝胶电泳和多位点序列分型(MLST)技术分析菌株同源性.结果 显示,51株CRKP对检测的15种临床常用抗菌药物呈广泛耐药,对其中的哌拉西林、头孢唑啉、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和环丙沙星耐药率为100％;对阿米卡星、庆大霉素和复方新诺明的耐药率较高,分别为76.5％、90.2％和62.8％;对替加环素耐药率较低,为3.9％.51株CRKP均检测出bla KPC基因,经测序鉴定为bla KPC-2基因,提示产KPC-2是CRKP对碳青霉烯类耐药的主要机制.MLST检测到4种ST型别,以ST11型为主,共43株(84.3％),另有ST15型6株(11.8％),ST4845型1株及1株新分型.51株CRKP的PFGE图谱相似性系数在62.9％～100％,可分为19个簇(A-S簇),每簇分别包含1～12个菌株.其中A簇(13.7％)和G簇(23.5％)包含的菌株相对较多,且MLST分型均为ST11型,为优势簇.G簇包含7个型别,G4型为主要克隆菌株.ST11型为CRKP的主要型别,PFGE分析表明该院存在菌株的克隆传播,应规范抗菌药物使用,同时加强细菌耐药性监测和医院内感染的防控工作.