猪脱细胞真皮基质与肿瘤坏死因子-α调控毛囊角质细胞Wnt3a/β-catenin信号通路表达的实验研究

目的:探讨猪脱细胞真皮基质(pADM)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对毛囊角质细胞Wnt3a蛋白/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路表达的影响.方法:①在小鼠背部皮肤用皮肤取样器制作8 mm全层皮肤缺损模型,用带有窗口的8 mm硅胶套环与创面皮缘缝合,分别使用纱布(纱布组)或pADM(pADM组)覆盖创面,观察创面愈合情况,并于第7、14、21天取从硅胶套环窗口处爬行的新生皮肤组织,通过免疫组化法检测皮肤组织中TNF-α、Wnt3a和β-catenin蛋白的表达水平.②在体外实验中,大鼠毛囊角质细胞分为对照组(正常培养)、pADM组、TNF-α组、TNF-α抑制剂组、TNF-α+pADM组、TNF-α抑制剂+pADM组6组,给予相应的干预措施培养48 h,免疫印迹法(Western Blot)检测各组细胞中Wnt3a、β-catenin蛋白表达量.结果:①体内实验结果显示,与纱布组比较,pADM组创面组织中的TNF-α、Wnt3a、β-catenin蛋白表达均上调,分别在第14、7、21天达峰值,各时间点之间差异均有统计学意义(P均<0.01).②体外实验结果显示,与对照组相比,毛囊角质细胞中的Wnt3a和β-catenin蛋白水平在TNF-α组表达下调,在pADM组、TNF-α抑制剂组、TNF-α+pADM组、TNF-α抑制剂+pADM组表达上调.pADM组与TNF-α抑制剂组比较,Wnt3a和β-catenin蛋白水平差异有显著性(P均<0.01),在pADM组上调水平更高;TNF-α抑制剂组与TNF-α抑制剂+pADM组相比,两蛋白表达水平的差异具有显著性(P均<0.01),TNF-α抑制剂+pADM组上调水平更高.结论:pADM在体内能够上调TNF-α、Wnt3a和β-catenin的蛋白表达,在体外可能具有TNF-α抑制剂样作用,并能加强TNF-α抑制剂的作用.pADM具有促进全皮层缺损创面愈合的作用,并可能通过上调毛囊角质细胞中Wnt3a/β-catenin蛋白的表达促进毛囊再生.