基于Wnt/β-catenin通路研究川续断皂苷Ⅵ对胫骨骨折模型大鼠骨折的修复作用

目的:观察川续断皂苷Ⅵ对胫骨骨折模型大鼠骨折的修复作用及其可能机制。方法:30只SD大鼠经锯开法建立胫骨骨折大鼠模型，随机分为模型组、干预组、联合组，每组各10只。术后第2天模型组每天腹腔注射生理盐水、DMSO溶液各0.2 ml；干预组每天腹腔注射川续断皂苷Ⅵ生理盐水溶液0.2 ml(10 mg/kg)，DMSO溶液0.2 ml；联合组每天腹腔注射川续断皂苷Ⅵ生理盐水溶液0.2 ml(10 mg/kg)，XAV939 DMSO溶液0.2 ml(1 mg/只)，均连续干预14 d。干预后2、4周采用Micro-CT扫描、X线片扫描观察骨折愈合情况；干预后4周检测胫骨湿重；苏木素-伊红(HE)染色观察骨痂组织病理学改变；Western blot法检测骨痂组织β-连环蛋白(β-catenin)、p-β-catenin、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达量。结果:干预组干预后2、4周骨体积分数(BV/TV)及骨小梁数量(Tb.N)、Lane-Sandhu评分、骨痂体积均高于模型组(均 P<0.05)；联合组干预后2、4周BV/TV及Tb.N、Lane-Sandhu评分、骨痂体积均低于干预组(均 P<0.05)。干预组干预后4周胫骨湿重高于模型组( P<0.05)；联合组胫骨湿重低于干预组( P<0.05)。HE染色结果显示，模型组有纤维组织增生，较多骨小梁生成，但成熟度不高、增粗不明显；干预组形成较多骨性骨痂，骨小梁排列有序、部分成熟，且矿化明显，与应力方向一致；联合组形成较多软骨性及纤维性骨痂，软骨性骨痂边缘矿化较多，并形成骨小梁，在间隙中可观察到丰富的毛细血管。干预组骨痂组织中Runx2及p-β-catenin/β-catenin蛋白表达量高于模型组，GSK-3β蛋白表达量低于模型组(均 P<0.05)；联合组骨痂组织中Runx2及p-β-catenin/β-catenin蛋白表达量低于干预组，GSK-3β蛋白表达量高于干预组(均 P<0.05)。 结论:川续断皂苷Ⅵ可有效促进胫骨骨折模型大鼠骨折修复，可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路来发挥作用。