基于斑马鱼模型评价注射用益气复脉(冻干)的心血管和肝脏安全性研究

目的 应用斑马鱼模型评价注射用益气复脉(冻干)(YQFM)的心血管毒性和肝毒性.方法 受精后48 h的野生型AB系斑马鱼随机分为空白对照组(未注射组)、溶剂对照组(注射0.9％氯化钠注射液10 nL)和YQFM 10、20、100、200、400、600、800和1000 ng组,iv给药4h后统计各剂量组斑马鱼死亡数量,计算最大非致死剂量(MNLD)和10％致死剂量(LD10)值.心血管毒性和肝毒性评价剂量设置为MNLD/10 (20 ng)、MNLD/3 (60 ng)、MNLD (200 ng)和LD10(400 ng);在显微镜下观察YQFM对斑马鱼心率的影响,观察斑马鱼有无心包水肿、血流速度变化、血液流失、心包瘀(出)血、血栓等,计算各表型发生率;在显微镜下对肝脏进行观察,对典型表型进行拍照,利用分析软件NIS-Elements D3.10分析肝脏面积、肝脏不透光度和卵黄囊面积.结果 YQFM MNLD和LD10分别为198.06 ng(约为200 ng)和397.12 ng(为400 ng);与溶剂对照组比较,YQFM 20、60 ng组斑马鱼未见异常,没有观察到心血管毒性,未见心包水肿,未见心率减慢,未见心律不齐;YQFM 200 ng组斑马鱼出现发生率较低的心血管毒性,表现为心包水肿(发生率仅为3.3％),未见心率减慢,未见心律不齐;400 ng组斑马鱼出现较轻微的心血管毒性,表现为心包水肿(发生率为13.3％)、血流变慢(发生率为6.7％)、血流缺失(发生率3.3％),未见心率减慢,未见心律不齐.与溶剂对照组比较,YQFM各剂量(20、60、200、400 ng)组斑马鱼相对肝脏大小、肝脏不透光度平均值和卵黄囊延迟吸收倍数均无统计学差异.结论 YQFM在MNLD剂量下,不诱发斑马鱼心血管毒性和肝脏毒性.