丙泊酚对肾母细胞瘤细胞迁移、侵袭及AMPK/mTOR/4EBP1通路的影响

目的 研究丙泊酚对人肾母细胞瘤 SK-NEP-1 细胞迁移、侵袭的影响以及作用机制.方法 对人肾母细胞瘤SK-NEP-1 细胞采用不同浓度(0、1μg/ml、2μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)丙泊酚进行干预,药物处理 48h,采用MTT法进行筛选后,以 5μg/ml丙泊酚作为后续实验剂量.按照AMPK抑制剂Compound C和丙泊酚给药情况,分为空白对照组(C组)、10μmol/L Compound C组(I组)、5μg/ml丙泊酚组(P1 组)和 10μmol/L Compound C+5μg/ml丙泊酚组(P2 组).采用Transwell法评估SK-NEP-1 细胞迁移和侵袭能力,采用蛋白质免疫印迹法检测AMPK、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和 4EBP1 及其磷酸化蛋白的表达.结果 P1 组穿过细胞数和迁移细胞数显著少于C组(P<0.05);比较C组、I组、P2 组的穿过细胞数和迁移细胞数,差异均无统计学意义(P>0.05).与C组相比,P1 组中p-AMPK/AMPK蛋白表达显著上调,且p-mTOR/mTOR蛋白和p-4EBP1/4EBP1 蛋白表达显著下调(P<0.05).C组、I组、P2 组各蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 丙泊酚可以抑制肾母细胞瘤SK-NEP-1 细胞迁移和侵袭,其机制可能与激活AMPK/mTOR/4EBP1 信号通路有关.