人参皂苷Rg1通过Sestrin2保护心肌细胞的作用

目的 研究人参皂苷 Rg1(G-Rg1)对抗心肌缺血再灌注损伤中 Sestrin2 的作用及相关机制.方法 体外培养大鼠 H9c2 心肌细胞,按实验要求随机分 5 组,分别为对照组,缺氧复氧组,G-Rg1 组,缺氧诱导因子-1α(Hypoxia Inducible Factor-1,HIF-1,HIF-1α)抑制剂组,Sestrin2 siRNA干扰组.流式细胞术检测各组心肌细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量.蛋白质免疫印迹法检测HIF-1α、Sestrin2、蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)、活化转录因子 6(the activating transcription factor 6,ATF-6)和跨膜蛋白激酶 1(inositol requiring enzyme 1,IRE-1)蛋白表达.免疫荧光法检测Sestrin2、HIF-1α、IRE-1 蛋白表达.结果 与对照组相比,缺氧复氧组细胞内ROS水平、HIF-1α、Sestrin2、ATF-6、PERK、IRE-1 蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与缺氧复氧组相比,G-Rg1 组细胞内ROS水平明显降低(P<0.05),HIF-1α、Sestrin2、ATF-6、PERK、IRE-1 蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与G-Rg1 组比较,HIF-1α抑制剂组心肌细胞内ROS水平升高,Sestrin2 蛋白表达明显下调(P<0.05);与G-Rg1 组比较,siRNA干扰组心肌细胞内ROS水平升高,IRE-1 表达明显升高(P<0.05).结论 G-Rg1 通过上调Sestrin2 表达,保护缺氧复氧心肌细胞,并维持内质网应激平衡稳态.