复方苦参注射液调节磷脂酰肌醇3激酶—丝氨酸/苏氨酸激酶信号通路对肺腺癌细胞生物学行为的影响

目的 探索复方苦参注射液抑制肺腺癌转移的可能的作用机制.方法 ①利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库、在线人类孟德尔网(OMIM)和Genecard数据库、STRING软件检索复方苦参注射液所含的 2 种成分苦参与土茯苓的活性成分及对应靶标,及其与肺腺癌重合的潜在靶基因、治疗肺腺癌的作用靶点,并对关键靶点进行基因本体(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析获知其潜在作用机制.②通过MTT比色法、Transwell、细胞划痕、流式细胞术等体外实验检测苦参注射液对人肺腺癌A549 细胞增殖、迁移侵袭、凋亡能力的影响;蛋白印迹法检测磷脂酰肌醇 3 激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化(p)-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达.结果 ①复方苦参注射液作用于肺腺癌共包含 2 味中药、58 种有效活性成分、127 个靶基因,KEGG通路富集分析涉及脂质与动脉粥样硬化、PI3K—AKT信号通路等生物学通路;②体外实验证实复发苦参注射液对肺腺癌A549 增殖的抑制作用呈剂量依赖性,并可减弱A549 细胞的迁移侵袭能力,增强细胞凋亡率,这一过程可能是通过抑制PI3K—AKT磷酸化水平,进而抑制该通路的促癌作用.结论 复方苦参注射液的活性成分大豆抗毒素、芸豆球蛋白、甘草素、刺芒柄花素等,可能通过作用于丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、TP53、MAPK3、AKT1、JUN、TNF等靶点,通过PI3K—AKT信号通路调控肿瘤微环境抑制肺腺癌的转移发生.