苍术内酯对骨关节炎大鼠软骨损伤修复和软骨细胞凋亡的影响

目的 探讨苍术内酯(AT)对骨关节炎大鼠软骨损伤修复和软骨细胞凋亡的影响及其可能作用机制.方法 60只7～8周龄SPF级雄性SD大鼠,48只大鼠采用前后交叉韧带断离术建立骨关节炎(OA)模型,造模成功大鼠采用随机分为模型组、AT低、中、高剂量组,各12只,另设对照组(12只).AT低、中、高剂量组腹腔注射5、10、20 mg/kg AT,对照组及模型组给予等量生理盐水,连续30 d.观察大鼠软骨组织形态计算Mankin's评分;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察软骨组织病理学变化;TUNEL法检测大鼠软骨组织细胞凋亡情况;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测大鼠软骨组织中微RNA-98-5p(miR-98-5p)表达、高迁移率族蛋白2(HMGA2)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blotting)检测大鼠HM-GA2、GSK-3β、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白表达情况.结果 模型组大鼠软骨组织HM-GA2、GSK-3β mRNA和Bcl-2蛋白表达降低,Mankin's评分[(8.62±0.69)分]比[(1.71±0.12)分]、TNF-α、IL-1β、IL-6、miR-98-5p、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率[(47.82±4.26)%比(8.41±1.74)%]显著升高(P<0.05);与模型组比较,AT低、中、高剂量组大鼠软骨组织HMGA2、GSK-3β mRNA和Bcl-2蛋白表达升高,Mankin's评分[(5.05±0.47)分、(4.68±0.36)分、(2.15±0.23)分]比[(8.62±0.69)分]、血清TNF-α、IL-1β、IL-6、miR-98-5p、Bax蛋白表达水平、细胞凋亡率[(32.05±2.84)%、(23.68±2.89)%、(12.15±2.13)%比(47.82±4.26)%]显著降低(P<0.05),且以AT高剂量组效果最佳.结论 AT能够调整OA大鼠血清炎性因子水平,抑制软骨细胞凋亡,可能是通过干扰miR-98-5p促进HMGA2、GSK-3β蛋白表达发挥作用.