花生AhFAD2作为选择标记构建含油量遗传群体

有性杂交是花生(Arachis hypogaea L.)育种的重要途径,真杂种鉴定对于遗传群体的构建以及新品种选育至关重要.花生含油量的表型鉴定极易受到环境条件的影响,且目前缺少可用的分子标记.本研究选用高油及普通油酸亲本宇花14号与低油及高油酸亲本LOP215杂交构建含油量相关遗传群体.宇花14号含有AhFAD2A及AhFAD2B位点,基因型为AABB,LOP215含有AhFAD2a及AhFAD2b位点,基因型为aabb.以宇花14号为母本、LOP215为父本杂交,收获F1杂交籽仁,采用竞争性等位基因特异性PCR(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)检测AhFAD2基因型,剔除AhFAD2基因型为纯合的籽仁,选留FAD2基因型为杂合的F1真杂种.F1真杂种单粒播种收获后,单株检测含油量,对于F2表型无明显分离的株系,取各单株叶片等量混合后提取DNA,进行AhFAD2基因型检测再次确认AhFAD2位点的杂合性.经二次验证后的F2籽粒经连续自交6代后选育出包含460个家系的重组自交系(recombinant inbred lines,RIL)群体,其含油量呈连续正态分布,可作为含油量基因定位的有效分离群体.本试验以AhFAD2作为选择标记能简单高效地筛选出真杂种,构建目标性状分离群体,为花生含油量基因定位及高低油花生品种选育提供材料.