基于Nrf2/Keap1通路探讨柴贝止痫汤对海人酸致痫大鼠的神经保护作用机制
Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine(2023)
Abstract
目的 探讨柴贝止痫汤对海人酸致痫大鼠氧化应激反应及核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)信号通路的影响.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机取10只作为假手术组,余20只采用海人酸侧脑室注射方法建立慢性复发性癫痫模型.将造模成功的大鼠随机分为癫痫组及柴贝止痫汤组各8只,柴贝止痫汤组大鼠给予柴贝止痫汤8.48 g/kg灌胃,假手术组和癫痫组大鼠给予生理盐水灌胃,均1次/d,连续8周.采用Morris水迷宫行为学实验评估大鼠空间学习及记忆能力,试剂盒检测血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,HE染色观察海马组织病理形态,Western blot法检测海马组织中Nrf2及Keap1蛋白表达情况.结果 与假手术组比较,癫痫组大鼠定位航行实验逃避潜伏期明显延长(P<0.05);空间探索实验中总路程明显延长(P<0.05),平台区域路程及平台象限停留时间均明显缩短(P均<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05);血清MDA含量明显升高(P<0.05),血清SOD及CAT活性均明显降低(P均<0.05);HE染色显示大鼠脑组织结构重度异常,海马CA1、CA3及DG区可见大量神经元变性,固缩深染,神经元纤维缠结;海马组织中Keap1蛋白表达量明显增加(P<0.05),Nrf2蛋白表达量明显降低(P<0.05).与癫痫组比较,柴贝止痫汤组大鼠逃避潜伏期和总路程均明显缩短(P均<0.05),平台区域路程及平台象限停留时间均明显延长(P均<0.05),穿越平台次数明显增加(P<0.05);血清MDA含量明显降低(P<0.05),SOD及CAT活性均明显增高(P均<0.05);HE染色显示大鼠脑组织结构轻度异常,可见少量神经元变性,固缩深染,个别神经元纤维缠结现象;海马组织中Keap1蛋白表达量明显降低(P<0.05),Nrf2蛋白表达量明显增加(P<0.05).结论 柴贝止痫汤可改善海人酸致痫大鼠空间学习及记忆能力,保护神经元细胞,作用机制可能与激活Nrf2/Keap1信号通路,抑制氧化应激反应有关.
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