缺氧相关的长链非编码RNA LINC00970在唾液腺腺样囊性癌中的表达及其作用

目的:探讨唾液腺腺样囊性癌（SACC）中长链非编码RNA（lncRNA） LINC00970表达与缺氧的关系及其作用。方法:低氧（1% O2）诱导48 h后，lncRNA芯片检测SACC-83细胞中缺氧诱导的lncRNA，并用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）验证。使用临床样本分析LINC00970在SACC组织中的表达及其与预后的关系。LINC00970敲低质粒转染SACC-LM和SACC-83细胞后，细胞增殖检测（CCK-8）和平板克隆实验检测细胞增殖能力和克隆形成能力，Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力，Western blot检测E-cadherin、Vimentin、Snail和N-cadherin的表达。荧光定量PCR、Western blot和Transwell等实验均重复3次所得均值为该样本测量值，使用SPSS 20.0软件进行统计学分析。SACC组织细胞与正常唾液腺组织中LINC00970相对表达量差异，采用配对t检验分析；比较沉默LINC00970对SACC-83和SACC-LM细胞增殖、克隆形成、侵袭及迁移能力的影响，以及LINC00970沉默对上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白的影响，应用独立t检验进行统计学分析。采用Kaplan-Meier法计算LINC00970的表达与SACC患者总生存时间的相关性，并绘制生存曲线。P<0.05为差异有统计学意义。结果:lncRNA芯片及实时荧光定量PCR结果显示，LINC00970是SACC-83细胞中在缺氧反应性表达最高的lncRNA（15.13 ± 0.57 vs 1.08 ± 0.06），差异有统计学意义（t = 24.56，P<0.001）。临床样本数据分析显示，LINC00970在SACC组织表达显著高于正常唾液腺组织（0.49 ± 0.41 vs 0.08 ± 0.16，t = 2.53，P<0.001），且LINC00970高表达患者生存率明显低于LINC00970低表达患者（HR = 0.42，P = 0.03）。SACC细胞敲低LINC00970后，缺氧促进的侵袭和迁移能力受抑制，且缺氧升高后的间质标志物N-cadherin表达下调，而缺氧诱导降低的上皮标志物E-cadherin恢复上调。结论:缺氧可诱导SACC细胞中LINC00970的表达，其高表达与SACC患者的不良预后密切相关，LINC00970可能通过调控EMT从而促进细胞侵袭和迁移。