吡嗪酰胺对人肝细胞L02的毒性及作用机制研究

目的 评价吡嗪酰胺(pyrazinamide,PZA)的肝脏毒性,并探讨其导致肝损伤的作用机制.方法 将L02细胞分为对照组,PZA给药组(25、125、625、3125μg/mL),N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetlg-L-cysteine,NAC)(10 mmol/L)+PZA(25、125、625、3125μg/mL)给药组,分别给予对应培养基及不同浓度PZA、NAC;采用流式细胞仪定量检测L02细胞凋亡数量、细胞内线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP);采用Western-blot法检测L02细胞内Fas、FADD、Cyt-c、Cleaved caspase-3的蛋白表达.结果 与对照组比较,各浓度P Z A给药组凋亡细胞比例均显著升高,且中晚期凋亡细胞比例较早期凋亡细胞比例明显增多;25、125μg/mL PZA给药组MMP分别降低32.23％、24.79％,3125μg/mL PZA给药组MMP位升高31.40％;3125μg/mL PZA给药组Fas蛋白表达升高;125、625μg/mL PZA给药组Cleaved caspase-3蛋白表达μg升高.PZA联用NAC后,各浓度组凋亡细胞比例低于单用PZA组,25、125、3125μg/mL组下降明显;25、625、3125μg/mL组与单用PZA组比较,MMP分别增加了21.95％、33.48％、22.33％;3125μg/mL组与单用PZA组比较Fas蛋白表达量降低47.50％;125、625、3125μg/mL组Cleaved caspase-3蛋白表达量分别降低66.13％、73.91％、41.67％.结论 PZA可能是通过死亡受体途径、线粒体途径诱导L02细胞凋亡从而导致肝损伤,联用NAC后可明显缓解PZA导致的肝损伤.