多靶点蛋白酪氨酸激酶抑制剂Ponatinib对人肝癌细胞SK-Hep-1增殖、黏附和迁移能力的影响

目的 探讨多靶点蛋白酪氨酸激酶抑制剂Ponatinib对人肝癌细胞SK-Hep-1增殖、黏附和迁移能力的影响.方法 常规培养SK-Hep-1细胞,分别加入Ponatinib等24种酪氨酸激酶抑制剂,MTT法检测Ponatinib对SK-Hep-1细胞存活和增殖的影响.常规培养SK-Hep-1细胞至融合度达90％,分别加入0.1、0.5和1.0μmol/L Ponatinib,同时设对照组(不加Ponatinib),细胞缓慢聚集试验和细胞分离试验检测Ponatinib对SK-Hep-1细胞黏附能力的影响;划痕试验检测Ponatinib对SK-Hep-1细胞迁移能力的影响;Western blot法检测Ponatinib对SK-Hep-1细胞中E-cadherin蛋白表达水平的影响.结果 24种酪氨酸激酶抑制剂对SK-Hep-1细胞均有抑制作用,其中Ponatinib抑制作用最强,IC50达(0.288±0.044)μmol/L.与对照组比较,0.1、0.5和1.0 μmol/L Ponatinib组细胞团块数明显减少(t分别为16.143、44.002、44.853,P均＜0.001),含EDTA(TE)及CaCl2(TC)胰酶消化后单个细胞数(N)的比值(NTC/NTE)明显降低(t分别为4.276、10.625、27.571,P均＜0.05),E-cadherin蛋白表达水平显著升高(t分别为-3.757、-4.561、-6.922,P均＜0.05);划痕24及48 h后,0.1μmol/L Ponatinib组细胞划痕迁移率差异无统计学意义(t分别为0.473和0.872,P均＞0.05),但0.5及 1.0 μmol/L Ponatinib组明显减小(t=6.272～16.733,P均＜0.01).结论 Ponatinib可抑制SK-Hep-1细胞增殖和迁移,促进细胞黏附.