低强度脉冲聚焦超声上调Vimentin蛋白表达抑制软骨细胞凋亡

目的 探讨低强度脉冲聚焦超声(focused low-intensity pulsed ultrasound,FLIPUS)通过机械效应抑制软骨细胞凋亡的分子机制.方法 用胰蛋白酶联合II型胶原酶提取C57BL/6J乳鼠膝关节原代软骨细胞进行体外实验,IL-1β处理细胞模拟骨关节炎样软骨细胞损伤并进行验证,同时检测不同处理时间下相关蛋白表达变化.细胞分为Control组、IL-1β组和IL-1β+FLIPUS组,流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡率,细胞免疫荧光检测各组细胞中Vimentin的结构分布.Western blot检测各组Col2αl、MMP13、Bcl-2、Vimentin及p-Tyr397表达.结果 提取软骨细胞并模拟了骨关节炎样软骨细胞损伤模型.与Control组相比,随着IL-1β处理时间的延长,Col2α1、Vimentin、p-Tyr397、Bcl-2和p-AKT蛋白表达降低(P＜0.05),MMP13、Bax和cleaved-Caspase3蛋白表达升高(P＜0.05).与IL-1β组相比,IL-1β+FLIPUS组软骨细胞凋亡水平降低(P＜0.001),MMP13表达下降(P＜0.05);Col2α1(P＜0.01)、Bcl-2、Vimentin及p-Tyr397表达上升(P＜0.05);Vimentin排列分布发生重塑,荧光强度增加.结论 FLIPUS上调软骨细胞Vimentin表达,促进FAK的Tyr397位点磷酸化,抑制软骨细胞凋亡.