基于NF-KB/Twist 1通路二甲双胍对GDM大鼠子代胎鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞EMT的作用机制

目的 探讨二甲双胍(Met)对妊娠糖尿病(GDM)大鼠子代胎鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞上皮间质转化(EMT)的作用及其机制.方法 将SD孕鼠随机分为正常组(Normal组)和GDM组.GDM组孕鼠采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立GDM模型,测定空腹血糖水平(FBG).无菌条件下取胎鼠肺组织,分离肺泡上皮细胞,不同浓度Met处理细胞48 h,MTT法检测细胞存活率.将肺泡上皮细胞随机分为对照组(Control组)、GDM组和Met组,Met组细胞用80 μmol/L Met处理48 h,Control组和GDM组细胞不做处理.Transwell实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR检测细胞中上皮钙粘蛋白(E-cad)、神经钙粘蛋白(N-cad)和波形蛋白(Vimentin)mRNA相对表达量,蛋白印迹法检测磷酸化核因子-κB(NF-κB)和Twist1蛋白相对表达量.结果 GDM组孕鼠的FBG水平明显高于Normal组(P＜0.05);细胞存活率随Met浓度的增加而降低,且具有剂量依赖性(P＜0.05);与Control组比较,GDM组侵袭细胞数、N-cad、Vimentin mRNA相对表达量以及p-NF-κB p65和Twist1蛋白相对表达量升高,E-cad mRNA相 对表达量降低(P＜0.05);与GDM组比较,Met组侵袭细胞数、N-cad、Vimentin mRNA相对表达量及p-NF-κB p65和Twist1蛋白相对表达量降低,E-cad mRNA相对表达量升高(P＜0.05).结论 Met可抑制GDM大鼠子代胎鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞EMT过程,其可能是通过抑制NF-κB/Twist1信号通路发挥作用.