PLCγ1对绵羊早期胚胎超微结构的影响

为了探究绵羊磷脂酶Cγ1(PLCγ1)基因对绵羊早期胚胎发育的影响,从微观角度解释胚胎的内部发育规律.卵母细胞分离培养至成熟,显微注射同等浓度的pcDNA3.1-EGFP-PLCγ1重组质粒后随机分成两组,PLCγ1处理组在注射后培养24 h、48 h;U73122处理组在显微注射后12 h向培养液中添加最优抑制PLCγ1的U73122浓度0.5 μmol/L,两组分别在24 h、48 h固定胚胎做超薄切片,电镜观察透明带、脂滴、线粒体及胚胎发育情况.结果表明,显微注射重组质粒后能够促进胚胎发育,并且随着胚胎的发育,透明带呈不规则性疏松,PLCγ1处理组与U73122处理组的不同时间段以及相同时间段之间,透明带厚度均存在极显著差异(P＜0.01).线粒体在胞质内呈均匀分布,PLCγ1处理组线粒体横脊少且形状规则,成熟的线粒体含量较多;U73122处理组线粒体嵴深且长,出现空泡化异常形态,线粒体异常率(31.72％±3.316％)极显著高于PLCγ1处理组(22.01％±6.652％).脂滴随机分布于各卵裂球中,U73122处理组脂滴形态出现异常,数量多于PLCγ1处理组.以上结果初步证明,绵羊早期胚胎发育过程中,PLCγ1基因可通过影响透明带厚度、线粒体及脂滴等改变细胞代谢水平从而调整胚胎发育.