抑制血清素转运蛋白表达联合Erastin诱导肠癌细胞铁死亡的实验研究

目的 观察肠癌SW480 细胞经铁死亡诱导剂Erastin处理后血清素转运蛋白(serotonin transporter,SERT)表达的变化,探索调控SERT表达联合Erastin对肠癌细胞铁死亡的影响.方法 Erastin处理肠癌SW480细胞,CCK8检测细胞的存活能力,Western blot评估细胞内血清素转运蛋白SERT及铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4和ACSL4的影响,流式细胞术分析癌细胞内ROS含量的变化.同时利用siRNA干扰下调细胞内SERT表达,观察调节SERT表达联合Erastin对癌细胞铁死亡的影响.结果 10 μmol/L Erastin处理肠癌SW480细胞可诱导癌细胞发生铁死亡,并显著上调细胞中SERT表达.siSERT后Erastin所致的癌细胞中铁死亡抵抗蛋白SLC7A11和GPX4下降更为显著,而铁死亡执行蛋白ACSL4则明显升高.5-HT刺激不仅逆转Erastin对SW480细胞所致的SLC7A11和GPX4减少及铁死亡作用,同时还使得Erastin联合siSERT对铁死亡的协同作用得到一定程度的抑制.结论 Erastin刺激在诱导肠癌SW480细胞发生铁死亡的同时,代偿性上调了SERT的表达;抑制SERT表达可增加肠癌细胞对Erastin的铁死亡敏感性.