Box-Behnken设计-响应面法优化人参干细胞培养体系

[目的]研究人参形成层干细胞(Cambial Meristematic Cell,CMCs)培养体系的构建及相关工艺优化.[方法]通过Box-Behnken设计-响应面法优化人参CMCs培养相关工艺.[结果]从人参形成层中分离得到人参形成层细胞CMCs,诱导分离的最佳培养条件为:B5+IAA 6 mg/L+IBA 6 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂粉7 g/L+L-抗坏血酸100 mg/L+柠檬酸150 mg/L,诱导率为50.54％;固体增殖的最佳培养条件为:B5+IAA 2.9 mg/L+IBA 2.6 mg/L+NAA 5.9 mg/L+蔗糖20 g/L+L-抗坏血酸100 mg/L+柠檬酸150 mg/L,增殖量为1.01 g;悬浮培养的最佳培养条件为:B5+IAA 5 mg/L+IBA 5 mg/L+NAA5 mg/L+蔗糖 20 g/L+L-抗坏血酸 100 mg/L+柠檬酸 150 mg/L,pH 6.2,增殖量为3.05 g;均为24.6℃暗培养.[结论]人参CMCs具备干细胞特征,Box-Behnken设计-响应面法适用于人参CMCs培养工艺的优化.