Potential Substance Basis and Molecular Mechanism of Erzhi Pill(二至丸)Affecting the Expression of AQP9 in Aging Rats

目的:利用分子对接与生物学验证方法探析滋阴补益肝肾方二至丸调控水通道蛋白9(Aquaporin9,AQP9)表达,延缓衰老的潜在物质基础与分子机制.方法:运用AutoDock Vina将二至丸活性成分与AQP9进行分子对接;利用ELISA法测定肝脏SOD活力、MDA含量;应用qPCR法测定肝脏端粒长度;采用WB法检测二至丸干预自然衰老大鼠的肝脏AQP9蛋白表达情况.结果:二至丸活性成分木犀草素、槲皮素、山柰酚、紫杉叶素、圣草酚、刺槐素、紫铆素、红车轴草素、蟛蜞菊内酯、β-谷甾醇、去甲基蟛蜞菊内酯、3'-O-甲酚均与AQP9分子结合能＜-5.0kcal/mol,配体与受体可自发结合.与幼年组相比,模型对照组SOD活力降低,MDA含量升高,肝脏端粒长度明显降低;与幼年、青年对照组比较,模型对照组肝脏AQP9表达下调(P＜0.05);与模型对照组比较,二至丸3.17 g/kg组MDA含量明显降低,二至丸0.79、1.59、3.17 g/kg组肝脏AQP9表达明显上调(P＜0.05).结论:二至丸活性成分能与AQP9自发结合,可能为二至丸调控AQP9表达的物质基础,二至丸可能通过影响肝脏AQP9表达调控物质代谢,发挥延缓衰老作用.