人参皂昔Rbl对环磷酰胺衍生物4-HC所致化疗脱发推演模型的保护作用初探

目的 探讨人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1,G-Rb1)对环磷酰胺衍生物4-氢过氧环磷酰胺(4-hydroperoxy cyclophosphamide,4-HC)所致体外化疗脱发推演模型的保护作用及潜在机制.方法 分离并培养人生长期毛囊(hair follicle,HF)及人毛囊上皮细胞(hair follicle epithelial cells,HFECs),将其分为 Control 组、4-HC 组、4-HC+N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)组和 4-HC+G-Rb1 组.通过 TUNEL染色检测HFECs凋亡、DCFH-DA探针检测HFECs中活性氧(reactive oxygen spe-cies,ROS)水平.通过 Western blot 检测凋亡相关蛋白(p53、Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl2),氧化应激相关蛋白(p-elf2α、CHOP、xbp1、BIP)及周期相关蛋白(p21、p27、Cyclin D、Cyclin E)的表达.在人HF器官培养模型中,结合HF生长长度、生长周期及TUNEL染色,观察HF形态学和毛球部细胞凋亡情况.结果 4-HC可诱导HFECs凋亡,上调p53、Caspase-3、Bax蛋白,下调Bcl2蛋白;4-HC可促进HFECs中ROS的生成,上调氧化应激相关蛋白p-elf2α、CHOP、xbp1、BIP的表达;4-HC可诱导G2/M期阻滞,上调p21和p27蛋白,下调Cyclin D和Cyclin E蛋白.ROS清除剂NAC和G-Rb1可下调p53、Caspase-3、Bax以及p21、p27蛋白,上调Bc12、Cyclin D、Cyclin E蛋白,有效缓解4-HC所致HFECs凋亡,抑制ROS生成.人HF器官培养模型中,4-HC可显著抑制毛发生长、促进生长期HF的退行性变,预处理NAC或G-Rb1可有效缓解4-HC所致毛发生长受阻及生长期HF退行性变;TUNEL染色证明4-HC组毛球周围TUNEL阳性凋亡细胞显著增加,预处理NAC或G-Rb1可显著抑制毛球部TUNEL阳性细胞.结论 G-Rb1对体外4-HC所致化疗脱发推演模型有保护作用,是预防化疗脱发的潜在有效药物.