基于SIRT1/AMPK/SREBP-1c通路探讨加味二陈汤对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂质代谢的影响

目的 探讨加味二陈汤对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝脏脂质代谢的影响及机制.方法 将40只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、阿托伐他汀组(0.05 g·kg-1)及加味二陈汤低、高剂量组(12、24 g·kg-1).采用连续10周高脂饲料饲养复制NAFLD小鼠模型.从第11周开始灌胃给药(10 mL·kg-1),每日1次,连续给药6周.第16周结束给药前,小鼠禁食12 h后腹腔注射1 g·kg-1葡萄糖溶液,于0、15、30、60、90、120 min测定小鼠血糖值.测定并记录各组小鼠体质量、肝脏质量,计算肝脏系数;检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)、总谷胱甘肽(TGSH)及肝脏组织TC、TG的含量或活性.采用HE染色法及油红O染色法观察肝组织病理变化;采用RT-qPCR及Western Blot法检测肝组织沉默信息调节因子1(SIRT1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)及甾醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)mRNA及蛋白表达情况.结果 造模结束后,与正常组比较,各造模组小鼠体质量显著升高(P＜0.01,P＜0.001).给药结束后,与正常组比较,模型组小鼠的体质量、肝质量及肝脏系数显著升高(P＜0.05,P＜0.001);血清TC、TG及LDL-C水平显著升高(P＜0.001),HDL-C水平显著降低(P＜0.001);肝组织TC、TG及血清ALT、AST水平显著升高(P＜0.05,P＜0.001);血清SOD、TGSH水平显著降低(P＜0.05,P＜0.001),空腹及注射葡萄糖后(15、30、60、90、120 min)的血糖水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01);肝组织细胞质可见大量的空泡,胞质出现大量红染的脂滴;肝组织SIRT1、AMPK mRNA及蛋白表达显著下调(P＜0.01),SREBP-1c mRNA及蛋白表达显著上调(P＜0.01,P＜0.001).与模型组比较,阿托伐他汀组及加味二陈汤低、高剂量组小鼠的体质量、肝质量、肝脏系数显著降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001);血清TC、TG及LDL-C水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001),HDL-C水平显著升高(P＜0.001);肝组织TC、TG及血清ALT、AST水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001);血清SOD、TGSH水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),空腹及注射葡萄糖后(15、30、60、90、120 min)的血糖水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01);肝细胞胞质内橘红色脂滴显著减少,脂质蓄积显著改善;肝组织SIRT1、AMPK mRNA及蛋白表达显著上调(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001),SREBP-1c mRNA及蛋白表达显著下调(P＜0.01,P＜0.001).结论 加味二陈汤对NAFLD小鼠肝脏脂质代谢有显著改善作用,其机制可能与调控SIRT1/AMPK/SREBP-1c通路有关.