肠道病毒A71型亚单位蛋白对RD细胞自噬活化的影响

肠道病毒A71型(Enterovirus-A71,EV-A71)能够活化宿主细胞的自噬并依赖自噬促进其复制,然而EV-A71的亚单位蛋白对自噬的活化目前仍不清楚.为探讨EV-A71亚单位蛋白对人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞自噬活化的影响,将EV-A71的亚单位蛋白重组真核质粒转染至RD细胞,采用抑制剂MK-2206阻断PI3K/Akt途径,共聚焦显微镜和免疫印迹检测自噬活化.过表达EV-A71亚单位蛋白的RD细胞中PI3K/Akt途径、p38、JNK和ERK途径均呈现不同程度活化,同时RD细胞呈现出绿色荧光表明自噬发生活化,特别是EV-A71的VP2和2A.EV-A71亚单位蛋白使LC3-Ⅱ/LC3-I的转化水平提升,EV-A71亚单位蛋白(VP2、VP3、VP4、2A、2B和2C)显著提升p62的表达水平,EV-A71 VP1显著下调p62的表达水平但显著上调LAMP-I和LAMP-2的表达水平.阻断PI3K/Akt途径后,过表达EV-A71亚单位蛋白的RD细胞绿色荧光强度显著减弱、自噬被阻断,同时LC3-II/LC3-I的转化水平显著降低而p62的表达水平提升,过表达EV-A71 VP1能提升p62表达水平但降低LAMP-1表达水平.因此,EV-A71亚单位蛋白能够不同程度依赖PI3K/Akt途径活化细胞自噬.