新型冠状病毒T细胞表位多肽不同免疫途径及佐剂对免疫应答的影响及长效免疫研究

很多研究表明T细胞免疫在抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染和预防重症死亡中起到关键作用.T细胞识别由抗原递呈细胞(Antigen-Presenting Cell,APC)递呈的与主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)结合的短肽,因此新冠T细胞多肽疫苗成为研究重点之一.本研究利用三条C57BL/6J小鼠MHC II类分子限制性的新冠T细胞表位多肽分别结合目前已经在临床上市使用的佐剂:铝佐剂,5'cytosine-phosphate-guanine 3'oligonucleotide(CpG-OND,以下简称CpG)佐剂以及铝加CpG佐剂制备成小鼠新冠T细胞多肽疫苗,通过皮下、肌肉、滴鼻(CpG佐剂组别)三种给药方式两次免疫C57BL/6J小鼠,在二免后14 d和6个月(CpG佐剂组别)后利用荧光免疫斑点实验(FluoroSpot)评价疫苗刺激小鼠脾脏淋巴细胞产生的辅助型T细胞1(T helper 1 cell,Th1)应答细胞因子—干扰素γ(Interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor α,TNF-α)和白细胞介素2(Interleukin 2,IL-2)以及Th2应答细胞因子—IL-4、IL-10和IL-5的水平情况.实验结果显示,不管使用哪种佐剂,皮下免疫产生了更好的效果;皮下和肌肉免疫使用CpG佐剂产生的细胞因子水平良好但应答水平较AL加CpG佐剂比更向Th1极化,而滴鼻免疫的Th1/Th2应答水平更为平衡.结合AL加CpG佐剂的皮下免疫组小鼠分泌了高水平且Th1/2平衡的细胞因子.结合CpG佐剂的小鼠二免后6个月IFN-γ分泌水平降低,但仍能产生较多的斑点,且滴鼻免疫组小鼠IFN-γ并没有出现显著降低.本研究结果提示T细胞多肽疫苗结合AL加CpG佐剂通过皮下免疫途径产生更好的细胞免疫应答,结合单独CpG佐剂的滴鼻免疫方式同样产生了较好的T细胞免疫应答和长效T细胞免疫,二者同时也维持了良好的Th1/Th2应答平衡.本研究对新冠T细胞多肽进行了免疫途径和佐剂的条件摸索,具有一定参考价值.