Zeste基因增强子同源物2抑制剂减轻氧糖剥夺/再灌注诱导的神经元氧化应激和铁死亡

目的 探讨Zeste基因增强子同源物2(EZH2)抑制剂GSK126 在神经元缺血-再灌注损伤中的作用及机制.方法 采用海马神经元HT22 细胞制备氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)模型.细胞分为正常对照组(Control组)、OGD/R模型组(OGD/R组)和OGD/R模型+低、中、高浓度EZH2 抑制剂组(OGD/R+GSK126 0.5、1、5 μmol/L组).采用CCK-8 法、流式细胞术检测各组HT22 细胞损伤,相应试剂盒检测细胞氧化应激指标活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值.通过荧光探针 C11 BODIPY 581/591 和FerroOrange检测细胞内铁死亡指标脂质过氧化物(Lipid ROS)和Fe2+含量.实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印记法(Western blot)实验检测细胞EZH2、NRF2、HO-1、SLC7A11 和GPX4 的mRNA和蛋白表达.结果 与Control组比较,OGD/R组HT22 细胞活力降低,细胞死亡率升高,细胞内ROS水平升高,MDA含量增加,GSH/GSSG比值减少,Lipid ROS、Fe2+含量增加,EZH2 的mRNA和蛋白表达升高,NRF2、HO-1、SLC7A11 和GPX4 的mRNA和蛋白表达均降低(P值均<0.05).与OGD/R组比较,OGD/R+GSK126 0.5、1、5 μmol/L组HT22 细胞活力均升高,细胞死亡率均下降,细胞内ROS水平均下降,MDA含量均减少,GSH/GSSG比值均增加,Lipid ROS、Fe2+含量均减少,EZH2 的mRNA和蛋白表达均降低,NRF2、HO-1、SLC7A11 和GPX4 的mRNA和蛋白表达均升高(P值均<0.05).结论 EZH2 抑制剂GSK126 可减轻OGD/R诱导的神经元细胞损伤,其机制可能与NRF2/HO-1 通路抑制氧化应激和SLC7A11/GPX4 通路抑制铁死亡有关.