雌马酚对高糖高脂诱导的成骨细胞线粒体损伤的保护作用

目的 观察雌马酚(equol,Eq)干预对高糖高脂诱导的成骨细胞的影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养ROS1728成骨细胞,以不同浓度的Eq、棕榈酸钠(sodium palmitate,PA)和葡萄糖(glucose,GLU)处理48 h,通过HE染色观察细胞核凋亡表现及CCK-8法检测细胞存活率确定GLU、PA及Eq干预的适宜浓度.将细胞分为对照(Control)组(GLU,5.5 mmol/L)、模型(Model)组(GLU,30 mmol/L+PA,250 μmol/L)、LEq 组(Model+1×10-8mol/L Eq)、MEq 组(Model+1×10-7mol/L Eq)、HEq组(Model+1×10-6mol/L Eq).CCK8检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst33342染色和HE染色观察细胞核凋亡表现,透射电镜观察线粒体结构,Mito-Tracker Red CMXRos(线粒体红色荧光探针)染色检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化情况,Western blot检测Sirt1、PGC-1α、Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达.结果 与对照组相比,当GLU和PA浓度分别为30 mmol/L和250 μmol/L时细胞存活率显著降低(P＜0.05),凋亡率升高,确定为诱导成骨细胞高糖高脂环境的适宜浓度;与模型组相比,Eq干预后细胞存活率显著升高、凋亡率显著降低(P＜0.05),线粒体结构受损明显改善、MMP显著升高(P＜0.05),同时ROS显著减少(P＜0.05);细胞Sirt1、PGC-1α、Bcl-2表达水平显著升高,Bax、Cleaved caspase-3表达水平显著降低(P＜0.05).结论 Eq干预可有效减少高糖高脂诱导的成骨细胞线粒体损伤、氧化应激和细胞凋亡,其部分机制可能与Eq促进Sirt1、PGC-1α表达有关.