烟雾提取物对转化生长因子β 1刺激的人胚肺成纤维细胞增殖及分化的影响

目的:研究烟雾提取物(SE)对转化生长因子β 1(TGF-β 1)刺激的人胚肺成纤维细胞MRC-5增殖及分泌羟脯氨酸(HYP)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Col Ⅲ及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响。 方法:本研究为实验研究。采用完全培养基将通过自制装置提取出的烟雾成分制备成不同浓度(0%、1%、2%、5%、10%)的SE溶液，选用MRC-5细胞进行细胞培养，将其分为对照组和TGF-β 1组。TGF-β 1组在TGF-β 1刺激MRC-5细胞1 d后用含不同浓度SE的培养基继续培养48 h，对照组采用普通培养基和不同浓度SE的培养基培养。通过CCK-8试剂检测细胞活力，观察不同浓度SE对细胞数量、大小、形态及胶原合成的影响，并制作细胞爬片，天狼星红染色后行胶原定量检测，最后ELISA法检测HYP、Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA水平，qRT-PCR检测Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA mRNA表达水平。 结果:对照组中，不同浓度SE均抑制细胞的增殖，抑制胶原的合成，抑制HYP、Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA的水平，且随着浓度增加，抑制作用越明显；TGF-β 1组中，1%、2%的SE促进细胞的增殖，HYP、ColⅠ、Col Ⅲ、α-SMA的水平增加，且2%的SE最显著，5%的SE对细胞的影响不显著，但10%的SE抑制细胞的增殖，抑制胶原的表达，Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA的水平下降。 结论:低浓度SE通过TGF-β 1介质促进MRC-5细胞增殖与分化，高浓度SE对MRC-5细胞的增殖与分化起抑制作用，提示TGF-β 1是烟雾吸入损伤后肺纤维化的重要中间介质。