GCSH基因在胃癌SNU-1细胞增殖和凋亡中的作用研究

Journal of International Oncology(2023)

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摘要
目的:探究敲低甘氨酸裂解系统H蛋白(GCSH)在体外对胃癌SNU-1细胞增殖、凋亡、氧化应激和迁移的影响。方法:体外培养SNU-1细胞并分为对照组(不做转染)、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)、GCSH敲低组(转染GCSH siRNA),使用定量PCR方法检测敲低效果,使用免疫荧光观察各组细胞的形态,CCK-8实验检测SNU-1细胞增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡水平和氧化应激水平,划痕实验检测细胞迁移。结果:定量PCR实验显示,对照组、阴性对照组、GCSH敲低组的GCSH相对表达量分别为1.29±0.16、1.36±0.17、0.32±0.04( F=90.32, P<0.001),对照组与阴性对照组差异无统计学意义( P=0.497),GCSH敲低组较阴性对照组显著减少( P<0.001)。免疫荧光观察各组细胞的形态无显著差异。CCK-8实验结果显示,对照组、阴性对照组、GCSH敲低组的细胞增殖活力分别为2.63±0.12、2.61±0.14、2.45±0.14( F=6.35, P=0.005),对照组与阴性对照组差异无统计学意义( P=0.751),GCSH敲低组较阴性对照组显著降低( P=0.011)。流式细胞术结果显示,对照组、阴性对照组、GCSH敲低组SNU-1细胞早期凋亡率分别为(13.38±0.45)%、(12.86±0.65)%、(20.04±3.61)%( F=15.37, P<0.001),对照组与阴性对照组差异无统计学意义( P=0.559),GCSH敲低组较阴性对照组显著增加( P=0.002);3组细胞晚期凋亡率分别为(2.21±0.25)%、(2.68±0.45)%、(5.67±1.67)%( F=18.24, P<0.001),对照组与阴性对照组差异无统计学意义( P=0.356),GCSH敲低组较阴性对照组显著增加( P=0.024)。对照组、阴性对照组、GCSH敲低组活性氧阳性率分别为(26.98±8.79)%、(28.27±5.63)%、(48.41±0.94)%( F=22.56, P<0.001),对照组与阴性对照组差异无统计学意义( P=0.950),GCSH敲低组较阴性对照组显著升高( P<0.001)。对照组、阴性对照组、GCSH敲低组的细胞迁移率分别为(48.29±5.79)%、(51.66±2.29)%、(14.01±1.56)%( F=148.80, P<0.001),对照组与阴性对照组差异无统计学意义( P=0.328),GCSH敲低组较阴性对照组显著降低( P<0.001)。 结论:敲低GCSH基因可在体外抑制SNU-1细胞增殖和迁移,增加细胞凋亡率和氧化应激水平,GCSH基因可能是治疗胃癌的潜在靶点。
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关键词
Gastric neoplasms,GCSH,Apoptosis,Cell migration
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