柴胡疏肝散调控Notch通路抑制慢性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化的研究

目的 观察柴胡疏肝散对慢性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化病变的抑制作用,并探讨其对肝组织Notch通路的调控作用.方法 采用高脂饮食喂养50只成年SD大鼠建立慢性脂肪性肝炎模型,对建模成功者采用随机数字表分为模型组、阳性组及柴胡疏肝散低、中、高剂量组,另取8只成年SD大鼠记为正常组.阳性组予以罗格列酮2 mg/kg灌胃,柴胡疏肝散低、中、高剂量组分别予以3.15、6.30、12.60 g/kg柴胡疏肝散药液灌胃,模型组和正常组每100 g大鼠体质量予以1 mL质量分数为0.9%的氯化钠溶液灌胃,均每天1次,持续10周.HE染色观察建模情况;ELISA法检测各组大鼠干预后血清肝功能;放射免疫法检测各组大鼠干预后血清肝纤维化指标和羟脯氨酸(Hyp)含量;改良氯胺-T法检测肝组织Hyp含量;HE染色观察各组干预后肝组织病变,天狼猩红染色观察肝纤维化病变;采用RT-qPCR法及Western blot法分别检测各组干预后肝组织转化生长因子-β 1(TGF-β1)、Notch1、Notch3、发状分裂相关增强子-1(Hes1)、α-肌动蛋白(α-SMA)m R N A和蛋白表达.结果 干预后模型组血清肝功能和肝纤维化指标、肝组织Hyp含量均高于正常组,阳性组和柴胡疏肝散低、中、高剂量组均低于模型组,柴胡疏肝散低剂量组均高于阳性组,柴胡疏肝散高剂量组均低于阳性组,上述差异均有统计学意义(P<0.05).模型组肝纤维化病变显著,阳性组和柴胡疏肝散低、中、高剂量组均减轻,且柴胡疏肝散高剂量组与正常组最为接近.模型组干预后肝组织TGF-β1、Notch3、Hes1、α-SMA mRNA及蛋白相对表达量均高于正常组,阳性组和柴胡疏肝散低、中、高剂量组均低于模型组,柴胡疏肝散低剂量组均高于阳性组,柴胡疏肝散高剂量组均低于阳性组,而Notch1 mRNA及蛋白的变化趋势正相反,上述差异均有统计学意义(P<0.05).结论 对慢性脂肪性肝炎大鼠予以柴胡疏肝散灌胃可减轻肝损害,抑制肝纤维化病变,推测与其调控Notch通路,抑制TGF-β1、Notch3、Hes1、α-SMA表达,上调Notch1表达有关.