丁苯酞对帕金森细胞模型保护作用的实验研究

目的 通过丁苯酞(dl-3-n-butylphthalide,NBP)处理帕金森细胞模型,探究NBP保护作用的分子机制.方法 用N-甲基-4-苯基吡啶鎓碘化物(MPP+)处理大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12构建帕金森细胞模型.实验分组为Control组、MPP+组、MPP++ML385 组、NBP 组、NBP+MPP+组与 MPP++NBP+ML385 组.Control 组:无血清培养基培养 24 h;MPP+组:含 1 mM MPP+无血清培养基培养24 h;MPP++ML385组:含5 μM ML385的1 mM MPP+无血清培养基培养24 h;NBP组:含20μM NBP无血清培养基培养24 h;NBP+MPP+组:含1 mM MPP+无血清培养基培养24 h后,再用20 μM NBP培养4 h;MPP++NBP+ML385组:含1 mM MPP+无血清培养基培养24 h后,再用含ML385的20 μM NBP培养4 h.镜下观察各组细胞形态变化,CCK-8检测各组细胞存活率,采用Western blot检测各组核因子E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)、酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)及α-突触核蛋白(α-syn)的表达.结果 与Control组相比,MPP+组体积变小,部分皱缩变圆,细胞数量减少,细胞存活率下降,α-syn表达增加(P＜0.000 1),Nrf2(P＜0.05)及TH的表达减少;与MPP+组相比,NBP+MPP+组细胞数量增多且细胞形态有所恢复,细胞存活率升高,逆转了 Nrf2、α-syn和TH的表达,且均具有统计学意义(P＜0.001);与NBP+MPP+组相比,MPP++NBP+ML385组体积变小、胞体皱缩成球形,细胞数量和突触明显减少,细胞存活率下降,Nrf2及TH(P＜0.01)表达减少,α-syn的表达增多(P＜0.01).结论 NBP可能通过上调Nrf2对MPP+诱导的PC12细胞发挥神经保护作用.