Fonsecaea monophora黑素的提取及毒力分析

目的 构建Fonsecaea monophora(F.monophora)小鼠足垫黑素接种模型,分析不同来源F.monophora黑素毒力差异,初步探讨F.monophora黑素毒力及毒力的影响因素.方法 使用化学消化法及酸碱法提取F.monophora黑素,构建小鼠足垫黑素接种模型(分为PBS组、化学消化法组、酸碱法组、人工合成黑素组),测量小鼠足垫肿胀程度,HE染色观察炎症细胞浸润情况并进行半定量分析.结果 化学消化法及酸碱法均成功提取F.monophora黑素,其中化学消化法保留了黑素在细胞壁的空间形态.化学消化法组小鼠足垫肿胀程度最强、持续时间最长、炎症反应最剧烈,注射后第1天有大量中性粒细胞及巨噬细胞聚集,注射后第7天见中性粒细胞、巨噬细胞及淋巴细胞浸润;酸碱法组可引起相似的炎症反应,但程度较化学消化法组轻;人工合成黑素组未引起明显足垫肿胀,见少量巨噬细胞,未见明显中性粒细胞及淋巴细胞浸润.结论 化学消化法及酸碱法提取的F.monophora黑素可明显引起小鼠足垫的炎症反应,黑素复杂的空间结构与毒力相关.人工合成黑素无法模拟F.monophora的毒力作用;与酸碱法提取的黒素相比,化学消化法提取的黑素用于真菌黑素毒力研究具有优势.