养正消积胶囊通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导肺腺癌细胞凋亡和自噬的作用研究

目的:探讨养正消积胶囊通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导肺腺癌细胞凋亡和自噬的作用机制.方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台对养正消积胶囊重要的4 个组分进行分析,筛选有效化合物及与肺腺癌相关基因,并对作用通路进行预测;使用DMSO法对养正消积胶囊成分进行提取后标记为DME25,取对数生长期肺腺癌A549 细胞,依据不同DME25 浓度分为空白对照组、DME25 高(1∶200)、中(1∶1 000)、低浓度组(1∶5 000).经药物干预 48h后,Western blot法检测细胞凋亡、自噬及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平变化.结果:与正常对照组相比,DME25 低、中、高浓度组中A549 细胞增殖能力、迁移、侵袭能力减弱,凋亡率均增高,且呈剂量依赖性.Western blot 结果显示,A549 细胞经DME25 干预24h后,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1 表达水平升高,同时促进LC3Ⅰ向ILC3Ⅱ转化(P＜0.01).与对照组对比,经DME25 干预的各组A549 细胞中的 p-PI3K、p-AKT及 p-mTOR蛋白含量均降低,加入 PI3K激活剂 740Y-P后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR表达均增多且Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低.结论:养正消积胶囊可能是通过下调A549 细胞中PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平,促进细胞自噬,抑制PI3K/Akt/mTOR 信号通路的促癌作用.