两种不同造模方法形成的酒精性肝病小鼠模型比较
Journal of Clinical and Experimental Medicine(2023)
Abstract
目的 明确两种不同造模方法对酒精性肝病模型小鼠的肝脏脂变、炎症及铁沉积的影响.方法 分别采用酒精液体饮食喂养C57BL/6小鼠10 d和8周,分为10 d对照组(对照饮食)、10 d模型组(酒精液体饮食)、8周对照组(对照饮食)、8周模型组(酒精液体饮食),每组10只.造模结束后留取各组小鼠血清及肝脏组织检测.采用苏木精-伊红、油红O、普鲁士蓝染色分别观察小鼠肝脏炎症、脂变、铁沉积情况.依据相应试剂盒说明书检测血清中肝功能生化指标[天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)]、脂质相关生化指标[血清甘油三脂和总胆固醇]、铁代谢相关生化指标[血清铁调素、血清铁及总铁结合力(TIBC)、转铁蛋白饱和度(TS)].采用Real-time PCR(qPCR)检测肝脏炎症相关基因IL-1β、IL-10以及铁代谢相关基因HAMP的表达.结果 苏木精-伊红染色显示10 d和8周模型组仅少量炎症细胞浸润;油红O染色显示10 d及8周模型组较对照组均出现明显脂变;普鲁士蓝染色显示10 d及8周模型组较对照组均无明显铁沉积.10 d模型组的血清ALT、AST水平以及IL-1β表达均较10d对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05),两组间IL-10表达差异无统计学意义(P>0.05).8周模型组血清ALT、AST水平以及IL-1β、IL-10表达与8周对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).10 d模型组甘油三酯、总胆固醇水平均较10 d对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);8周模型组甘油三酯、总胆固醇与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).两组模型中血清铁均较对照组均有一定上升趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05).10 d模型组与10 d对照组TS水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);8周模型组TS水平较8周对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05).10 d及8周模型组的TIBC水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).10 d模型组与10 d对照组血清铁调素水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);8周模型组的血清铁调素水平较8周对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05).肝脏HAMP基因表达在10 d和8周模型组均较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 10 d及8周酒精喂养均能建立酒精性脂肪肝模型,均能引起肝脏轻度炎症,但肝脏均无明显铁沉积,可能需要延长造模时间或额外铁负荷才能建立酒精肝铁过载模型.
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