基于网络药理学与实验验证探讨肝豆灵改善Wilson病肝纤维化机制

目的:通过网络药理学和铜负荷小鼠实验验证探讨肝豆灵改善Wilson病(Wilson disease,WD)肝纤维化作用机制.方法:使用TCMSP平台获取肝豆灵中各药的主要化学成分及对应的基因靶点.通过基因卡片数据库(GeneCards)、药物总数据库(DrugBank)、遗传药理学与药物基因组学数据库(PharmGKB)、疾病相关的基因与突变位点数据库(DisGeNET)搜索筛选疾病主要靶点.取药物-疾病靶基因交集后,使用STRING网站分析靶基因的蛋白质间相互作用联系度,将分析出的数据导入到Cytoscape3.8.2软件中分析蛋白质相互作用网络,并用R语言获取GO与KEGG数据库进行富集分析.在此基础上,通过MASSON染色观察铜负荷小鼠模型肝组织纤维化程度,使用蛋白免疫印迹法(western blot,WB)验证网络药理学分析结果.结果:网络药理学分析出药物-疾病交集基因108个,通过PPI网络分析发现JUN是关键基因,KEGG通路富集分析结果显示MAPK信号通路是重要潜在通路.动物实验表明肝豆灵可减轻铜负荷小鼠肝纤维化,抑制P38、JNK、C-JUN磷酸化.结论:肝豆灵治疗WD肝纤维化可能与其抑制P38/JNK信号通路有关.