miR-34c抑制NLRP3炎性小体诱导的小胶质细胞焦亡机制研究

目的:探索miR-34c在调控NLRP3 炎性小体激活caspase-1 信号通路诱导小胶质细胞焦亡中的作用.方法:观察脂多糖(LPS)联合ATP激活小胶质细胞后,通过乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒检测LDH的释放,以判断小胶质细胞细胞膜的完整性;再对miR-34c转染后的小胶质细胞在LPS和ATP激活下,观察小胶质细胞细胞膜变化.采用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)分别检测miR-34c转染后的小胶质细胞和未转染的小胶质细胞在LPS和ATP刺激下活力变化情况.采用蛋白免疫印迹分别检测LPS+ATP诱导的小胶质细胞(对照组)中和miR-34c转染后小胶质细胞(观察组)中的蛋白表达情况,如NLRP3 炎性小体、caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18.结果:LPS+ATP联合诱导下的小胶质细胞较正常的小胶质细胞,miR-34c表达减少(P<0.01);观察组小胶质细胞LDH释放水平较对照组下降(P<0.01);CCK-8 测试细胞活力中,2 组小胶质细胞除第1 天活力差异无统计学意义(P>0.05)外,其他时间观察组均明显高于对照组(P<0.01);观察组中小胶质细胞中NLRP3 炎性小体、caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 生成较之对照组小胶质细胞中炎性小体相关因子减少(P<0.01).结论:miR-34c可以抑制LPS+ATP诱导的小胶质细胞焦亡,可能通过降低NLRP3 炎性小体活化及下游caspase-1 依赖细胞焦亡信号通路关键蛋白表达有关.