紫草素对糖尿病小鼠中性粒细胞胞外诱捕网表达的影响

目的:探讨紫草素对佛波酯(PMA)诱导的糖尿病小鼠骨髓来源的中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的影响,为其治疗糖尿病足溃疡提供依据.方法:采用链脲佐菌素腹腔注射构建糖尿病小鼠模型,密度梯度离心法提取小鼠骨髓来源的中性粒细胞,并进行体外培养,PMA刺激其诱导NETs模型,采用CCK-8 法筛选紫草素的安全剂量;采用Sytox Green核酸荧光染料法定量检测NETs水平;PicoGreen荧光染料法定量检测dsDNA/NETs含量;荧光探针定量检测中性粒细胞活性氧(ROS)水平;荧光免疫组化法检测NETs标志物瓜氨酸化组蛋白H3(Cit-H3)的表达水平.结果:紫草素在 0.125～1 μg/mL浓度范围内对中性粒细胞活性无影响.与模型组比较,紫草素 1、0.5、0.25 μg/mL浓度组中性粒细胞NETs产生的荧光强度显著降低(P<0.01),细胞外dsDNA水平显著降低(P<0.01),细胞内ROS水平显著降低(P<0.01),细胞Cit-H3 表达显著下调(P<0.01).结论:紫草素通过抑制糖尿病小鼠骨髓来源的中性粒细胞ROS水平和Cit-H3 表达,从而抑制NETs生成而发挥抗炎作用,为紫草素治疗糖尿病足溃疡提供了理论依据.