miR-517在子痫前期患者胎盘外泌体中的表达及其对滋养层细胞侵袭与T细胞增殖的影响

目的 探讨在子痫前期(PE)患者的胎盘组织与胎盘外泌体中微小RNA-517(miR-517)的表达及其对滋养层细胞侵袭与T细胞增殖的影响.方法 收集2020年5月至2021年5月于海南医学院第二附属医院确诊为PE的患者50例(PE组)和50例健康孕产妇(NP组)的胎盘绒毛组织和外周血,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测两组胎盘绒毛组织中miR-517的表达差异;分离外周血中的胎盘外泌体,采用透射电子显微镜(TEM)与纳米示踪技术(NTA)分析外泌体形态、大小分布及浓度,蛋白质印记法(Western blot)检测外泌体标志性蛋白CD63、肿瘤易感基101(TSG101)和胎盘特异性蛋白胎盘碱性磷酸酶(PLAP)的表达;体外培养人绒毛滋养层细胞HTR-8与人T细胞系Jurkat T细胞,将过表达miR-517的miR-517 mimic与阴性对照序列miR-NC转染至上述细胞中,并按细胞处理方式的不同将HTR-8与Jurkat T细胞各分为5组:对照组、miR-517 mimic组、miR-NC组、NP-外泌体组、PE-外泌体组;qPCR检测各组HTR-8或Jurkat T细胞中miR-517的表达水平,CCK-8检测其增殖能力;Transwell检测各组HTR-8细胞的侵袭能力.结果 与NP组比较,PE组胎盘组织与胎盘外泌体中miR-517的表达均明显降低(P＜0.05),且胎盘外泌体具有典型的圆盘状或新月形的双层膜结构,颗粒直径在30～150 nm,CD63、TSG101、PLAP表达升高(P＜0.05);与对照组比较,miR-517 mimic组与NP-外泌体组中miR-517表达和HTR-8细胞增殖及侵袭能力均明显升高(P＜0.05),Jurkat T细胞的增殖能力却明显降低(P＜0.05),miR-NC组均无明显改变(P＞0.05),PE-外泌体组中miR-517水平无明显差异(P＞0.05),但HTR-8细胞增殖及侵袭能力均降低(P＜0.05),而Jurkat T细胞的增殖能力却明显升高(P＜0.05).与NP-外泌体组比较,miR-517 mimic组中miR-517表达和HTR-8细胞增殖、侵袭能力均明显升高(P＜0.05),而Jurkat T细胞的增殖能力却降低(P＜0.05),PE-外泌体组中miR-517表达和HTR-8细胞增殖、侵袭能力均明显降低(P＜0.05),但Jurkat T细胞的增殖能力却升高(P＜0.05).结论 在PE患者胎盘组织与胎盘外泌体中表达下调的miR-517可能通过调控滋养层细胞侵袭与T细胞增殖参与影响PE的发生与发展.