依洛尤单抗预处理对小鼠心梗后心衰的改善作用及其机制

目的 观察依洛尤单抗预处理对小鼠心梗后心衰的改善作用,探讨其作用机制.方法 采用冠脉前降支结扎法建立心梗小鼠模型,153只小鼠被随机分为假手术组(sham组)、心梗组(MI组)和心梗+依洛尤单抗预处理组(MI+Evolo组).分别采用B超检测小鼠左心室射血分数、左心室短轴缩短率和左心室内径,Masson染色检测心肌梗死面积,Western blot检测心肌组织PCSK9、SIRT3、cleaved Caspase-9表达量,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡,qRT-PCR检测心肌组织心房钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)的转录水平.采用转录组测序检测各组小鼠之间心室肌中差异化表达基因,并进行细胞实验验证.用缺氧细胞培养箱培养原代心肌细胞构建心肌细胞缺氧模型,将原代心肌细胞分为对照组(Con组)、缺氧组(hypoxia组)、缺氧+依洛尤单抗预处理组(hypoxia+Evolo组)和缺氧+依洛尤单抗预处理+SIRT3干扰组(hypoxia+Evolo+si-SIRT3组).Western blot检测原代心肌细胞PCSK9、SIRT3、cleaved Caspase-9表达量,流式细胞仪检测原代心肌细胞凋亡,qRT-PCR检测原代心肌细胞ANP和BNP转录水平.结果 转录组测序结果显示,只有SIRT3的mRNA水平在sham组与MI组之间、MI组与MI+Evolo组之间的差异均具有统计学意义.相比于sham组,MI组小鼠心脏收缩功能显著下降(P<0.05),心肌细胞凋亡增加(P<0.05),心肌组织PCSK9表达量显著上调,SIRT3表达量显著下调(P<0.05).相比于MI组,MI+Evolo组小鼠心肌组织PCSK9表达量显著下降,SIRT3表达量显著提高(P<0.05),心脏收缩功能显著改善(P<0.05),心肌组织凋亡水平显著下降(P<0.05).与Con组比较,缺氧组细胞凋亡显著升高(P<0.05)、PCSK9表达量显著上调、SIRT3表达显著下调(P<0.05).相比于缺氧组,hypoxia+Evolo组原代心肌细胞PCSK9表达量显著降低,SIRT3表达量显著升高(P<0.05),凋亡水平显著降低(P<0.05).相比于hypoxia+Evolo组,hypoxia+Evolo+si-SIRT3组原代心肌细胞PCSK9表达量未见明显变化,SIRT3表达量显著下调(P<0.05),凋亡水平显著升高(P<0.05).结论 依洛尤单抗预处理可以通过激活SIRT3表达,降低心梗小鼠心肌细胞凋亡水平,改善小鼠心梗后心衰.