肾癌来源的IL4I1介导Treg诱导与募集的实验研究

目的:探讨肾癌细胞来源的白细胞介素 4 诱导蛋白 1(IL4I1)对调节性T细胞(Treg)的诱导与募集作用.方法:利用公共数据库分析肾透明细胞癌(ccRCC)组织中IL4I1 表达与Treg浸润的关系,通过免疫组织化学法(IHC)进行验证;构建稳定敲低IL4I1 的 786-O细胞系,进行转录组测序(RNA-Seq)及基因集富集分析(GSEA);实时荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)比较敲低 786-O细胞系IL4I1 表达后肾癌细胞表达趋化因子的变化,流式细胞术(FCM)分析体外IL4I1 对Treg诱导分化的影响.结果:IL4I1 在ccRCC组织中过表达(t=6.029,P＜0.05),并且随着IL4I1 表达的升高,肿瘤组织中Treg数量增加(F= 13.69,P＜0.05).GSEA显示,沉默IL4I1 表达的 786-O细胞系和对照细胞系的差异表达谱在细胞因子和趋化因子产生及负向调节其产生的生物学过程(BP)中富集(P.adjust =9.2×10-4、7.5×10-4、7.7×10-4、2.67×10-2).敲低IL4I1 表达后,786-O细胞表达的CC趋化因子配体(CCL)3、CCL4、CCL5、CCL8、CCL17、CCL19 在mRNA水平显著下调(t=6.250、7.716、20.640、5.324、6.360、3.484,均P＜0.05),同时细胞培养上清中CCL4、CCL5 浓度降低(t=6.773、13.64,均P＜0.05).与敲低表达IL4I1 细胞共培养的外周血单个核细胞中Treg比例少于对照组(t=3.843,P＜0.05).结论:肾癌组织中IL4I1 与Treg浸润密切相关,可能通过调控趋化因子的表达参与Treg在肿瘤局部的募集;肾癌细胞来源的IL4I1 能够促进Treg的分化.