基于网络药理学和实验验证雷公藤红素治疗肾癌的作用及机制
China Medical Herald(2023)
摘要
目的 运用网络药理学、分子对接技术及实验验证方法探讨雷公藤红素(CeT)治疗肾癌的作用与机制.方法 应用中药系统药理学数据库与分析平台、PubChem、NCBI Gene、STRING数据库及GO功能和KEGG通路富集分析CeT治疗肾癌的关键靶点和通路,然后运用Autodock Vina软件进行分子对接验证.选取人肾透明细胞腺癌细胞系786-O细胞,将其分为对照组(正常培养)及0.2、0.4、0.8 μmol/L CeT组(给予对应浓度的CeT),培养24 h后,采用免疫印迹法检测各组凋亡蛋白及相关通路蛋白水平.结果 共筛选得到CeT靶点53个,疾病靶点8881个,相互映射得到45个共有靶点.蛋白质-蛋白质相互作用网络分析共有靶点得到Bax、Bcl-2等核心靶点.GO富集分析得到469个条目,KEGG通路富集分析确立了 67条相关通路,主要包括细胞凋亡、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt激酶(Akt)通路、胱天蛋白酶9(caspase-9)、核因子κB(NF-κB)、P53等信号通路.分子对接结果显示,CeT与核心靶点结合活性良好.细胞实验结果显示,0.4、0.8μmol/L CeT组caspase-9、P53表达量高于对照组,Bcl-2、NF-κB表达量低于对照组,0.4 μmol/L CeT组Bax表达量高于对照组,0.8 μmol/L CeT组PI3K表达量低于对照组,0.2、0.4、0.8μmol/L CeT组p-Akt/Akt表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).0.8 μmol/L CeT组NF-κB表达量低于0.2 μmol/L CeT组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CeT可能通过PI3K/Akt通路、NF-κB和P53等信号通路影响Bax、Bcl-2等靶蛋白的表达,发挥多靶点和多途径治疗肾癌的作用.
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