解毒活血方灌肠对溃疡性结肠炎小鼠结肠炎症及肠道菌群的影响
Global Traditional Chinese Medicine(2023)
Abstract
目的 探讨解毒活血方灌肠对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠结肠炎症的抑制作用及对肠道菌群组成、多样性和代谢功能的影响.方法 80 只雄性C57BL/6 小鼠,随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组20 只.自由饮用 3%葡聚糖硫酸钠溶液 7 天建立UC模型,造模成功后西药组以浓度为1.33 g/kg美沙拉秦灌肠剂灌肠,中药组以生药浓度为12.24 g/kg混悬液灌肠,模型组、正常组给予生理盐水灌肠.干预 14 天后计算小鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI),测量结肠长度,观察结肠黏膜形态作黏膜损伤指数(colonic mucosa damage index,CMDI),结肠组织行苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色行组织学损伤评分(colon his-topathological score,CHS).留取小鼠结肠内粪便,采用 16S rRNA 测序技术检测粪便肠道菌群丰度、多样性及代谢功能的变化.结果 (1)与正常组相比,模型组DAI升高(P<0.01)、结肠长度缩短(P<0.05),CMDI、CHS升高(P<0.01);与模型组比较,中药组及西药组DAI下降,结肠长度增加(P<0.05),中药组CMDI、CHS降低(P<0.05).(2)经 16S rRNA技术测序后共得到 9628 个操作分类单元(operational taxonomic units,OTU),包括11 个门,109 个属.厚壁菌门、拟杆菌门、疣微菌门、变形菌门和放线菌门丰度>10%,为优势菌群.各组间菌群比较显示,与正常组比较,模型组Allobaculum菌、Turicibacter菌、双歧杆菌、梭状芽孢杆菌、Mucispirillum菌、消化链球菌、萨特氏菌、肠球菌OTU升高(P<0.05,P<0.01),AKK菌、Arthromitus菌、乳杆菌OTU降低(P<0.01).与模型组比较,西药组双歧杆菌、AKK菌OTU升高(P<0.05,P<0.01),肠球菌、梭状芽孢杆菌、萨特氏菌OTU降低(P<0.05,P<0.01);中药组Turicibacter菌、双歧杆菌、AKK菌、Allobaculum菌OTU升高(P<0.05,P<0.01),肠球菌、乳杆菌、梭状芽孢杆菌、Mucispirillum 菌、萨特氏菌 OTU 降低(P<0.05,P<0.01).与西药组比较,中药组双歧杆菌、Turicibacter 菌 OTU 升高(P<0.05,P<0.01),消化链球菌、萨特氏菌、乳杆菌、Mucispirillum菌OTU降低(P<0.05,P<0.01).与正常组比较,模型组 Alpha多样性指数 Observed OTUs、Chao1 下降(P<0.05),Beta 多样性距离 Bray Curtis、Weighted Unifrac、Unweighted Unifrac缩小(P<0.01);与模型组比较,中药组Bray Curtis增大(P<0.01),Observed OTUs、Chao1 升高(P<0.05),西药组 Bray Curtis、Unweighted Unifrac 增大(P<0.05);与西药组比较,Chao1、Bray Curtis增大(P<0.05).与正常组比较,模型组碳水化合物代谢降低、AMPK信号通路表达、脂类、萜类、聚酮代谢降低(P<0.05,P<0.01),氨基酸、维生素、辅酶代谢、多糖生物合成与代谢升高(P<0.01).与模型组比较,西药组AMPK通路表达、碳水化合物、多糖生物合成与代谢升高(P<0.05),萜类、聚酮代谢降低(P<0.05);中药组AMPK通路表达、碳水化合物、脂类、萜类、聚酮代谢升高(P<0.05,P<0.01),氨基酸、维生素、辅酶代谢,多糖生物合成与代谢降低(P<0.05).与西药组比较,中药组脂类、萜类、聚酮代谢升高(P<0.01),维生素、辅酶代谢,多糖生物合成与代谢降低(P<0.05,P<0.01).结论 解毒活血方灌肠能显著改善结肠炎症,可能与增加肠道益生菌,抑制病原菌及机会致病菌生长,提高肠道微生物的多样性,调整菌群代谢功能有关.
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