HCN通道对大鼠脊髓背角神经元P2X受体功能的调节作用
Journal of Zunyi Medical University(2023)
Abstract
目的 观察HCN通道对培养的大鼠脊髓背角神经元嘌呤能P2X受体激活诱发的[Ca2+]i的调节作用.方法 培养乳鼠脊髓背角神经元,分七组:对照组;ATP组(100 μmol/L);无钙液+ATP组(无钙液预先孵育 20 min,再加入ATP);PPADS+ATP组(50 μmol/L PPADS预先孵育 10 min,再加入ATP);ZD7288+ATP组(1、10、100、1000 μmol/LZD7288 预先孵育 10 min,再加ATP);8-Br-cAMP+ATP组(100 μmol/L 8-Br-cAMP孵育 10 min后加ATP);ZD7288+8-Br-cAMP+ATP组(先加 100 μmol/L ZD7288 孵育 10 min,再加 100 μmol/L 8-Br-cAMP孵育 10 min,最后加ATP).采用激光共聚焦显微镜检测神经元[Ca2+]i的变化.结果 ATP(100 μmol/L)可显著增加背角神经元的[Ca2+]i,P2X受体拮抗剂PPADS可阻断该作用(P<0.05);HCN通道拮抗剂ZD7288(10~1000 μmol/L)可剂量依赖性地抑制ATP(100 μmol/L)诱发的[Ca2+]i升高;8-Br-cAMP(膜透性cAMP类似物,一种PKA激活剂,100 μmol/L)可显著增强ATP诱发脊髓背角神经元[Ca2+]i升高的效应,而ZD7288(100 μmol/L,预孵育 10 min)可减弱 8-Br-cAMP 增强 ATP 诱发背角神经元[Ca2+]i 升高的效应(P<0.05),这说明阻断HCN通道活化可通过降低胞内cAMP-PKA活性而抑制脊髓背角神经元P2X受体功能.结论 HCN通道可通过改变cAMP-PKA活性而调节脊髓背角神经元P2X受体功能.
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