基于数字PCR绝对定量检测技术的研究进展

纵观每次检测技术和方法的发展和升级，很大程度上取决于两个重要的条件：一个是现有方法在可靠性、准确性等方面能达到的能力与满足实际工作需求间存在差距；另一方面则是科学技术本身的发展使得各种设想和要求变得具有可能性。毫无疑问，近几年频繁发生的食品安全事件而引发的公共关注度的提升已然对更高标准的检测方法和手段提出迫切的要求。不妨以几个实例来做一简单说明。一个例子是今年上半年欧洲的马肉风波事件，该事件在全球范围内引发公众对食物掺假问题的关注。但令人遗憾的是，在危机发生期间，甚至连欧洲各大主流的食品制造和零售商都无法绝对保证其肉制品不含有马肉成分。在现阶段，实时荧光PCR（qRT-PCR）技术被认为是检测的金标准。但是，其检测的灵敏度和检测范围与检测机构及公众的期待仍尚有差距。另外一个典型的例子是转基因检测，目前欧盟的规定是食品中某一成分的转基因含量达到该成分的0．9%时就须标识，但受制现行检测方法的灵敏度以及现行方法要实现定量必须依赖于标准品等因素，欧盟也在更加主动地尝试采用新的检测方法。与之相呼应的是现有的检测技术的发展。目前在生物检测技术领域，最为主流的手段是PCR技术。从上世纪八十年代中期诞生至今，这一极具跨时代意义的技术在今年恰好走过30年的光辉历程。但随着这个技术的普遍使用，其局限性也日益明显，技术的升级变得越来越迫切。正是在这样的背景之下，一项新的称为第三代的PCR技术—数字PCR技术孕育而生，并且很快就引来大量关注。人们希望，这一新的技术能带来检测技术的一场新革命。