浓缩生长因子和根管冲洗液对牙髓细胞的保护及贴附作用

目的 研究浓缩生长因子(CGF)、根管冲洗液对牙髓细胞的保护作用及贴附的影响.方法 通过改良组织块酶消化法从14～18岁因正畸或阻生需拔除的健康完整牙中分离出牙髓细胞并传代培养.抽取患者静脉血制备CGF凝胶,挤压成膜,剪成(3×3)mm2大小备用.实验组在培养基中分别加入1片CGF(低浓度组)、2片CGF(中浓度组)、3片CGF(高浓度组),对照组培养基为仅含10％FBS的DMEM培养基.分别在第3、5、7天,通过CCK-8检测CGF对牙髓细胞增殖的影响;碱性磷酸酶(ALP)检测CGF对牙髓细胞分化的影响;收集河北医科大学口腔医院颌面外科门诊因正畸拔除的下颌单根前磨牙,高速金刚砂车针开髓,拔髓,在釉牙骨质界处用金刚砂盘截去牙冠.分别使用次氯酸钠(A组)、EDTA(B组)、氯己定(C组)处理根管,纵向剖开牙根,暴露根管壁,截成1 mm×1.5 mm×1.5 mm大小置于75％乙醇15 min,PBS冲洗残留的乙醇,然后置于96孔板中,接种牙髓细胞,24 h后观察牙髓细胞的贴壁情况,检测CCK-8值.结果 CGF组能够促进牙髓细胞的增殖,并随时间延长和CGF浓度的增加牙髓细胞的增殖能力也增强.CCK-8结果显示第3天实验组和对照组吸光度差异无统计学意义(P>0.05),但在实验第5天、第7天时,实验组与对照组间差异有统计学意义(P<0.05).ALP试剂盒检测结果显示在第7天时CGF组中牙髓细胞的碱性磷酸酶活性明显高于对照组,吸光度之间差异有统计学意义(P<0.05).不同根管冲洗液处理根管并培养牙髓细胞24 h后,检测CCK-8值,结果显示在450 nm波长下次氯酸钠组吸光度值大于其他2组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 高浓度CGF能显著促进牙髓细胞的增殖和分化,有提高牙髓血运重建预后的可行性;次氯酸钠、EDTA、氯己定三种根管冲洗液比较,次氯酸钠可在牙髓细胞培养时有效的提高牙髓细胞对根管壁的贴附.