slfn5基因在卵巢癌上皮-间质转化中的作用及机制
Zhejiang Medical Journal(2022)
摘要
目的 探讨slfn5基因在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 收集杭州市第一人民医院确诊的卵巢癌患者手术切除标本,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测卵巢癌组织中slfn5 mRNA的相对表达量.采用Western blot法检测并比较卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、OVCAR3、HO8910中SLFN5蛋白的相对表达量;选取表达高的SKOV3、OVCAR3细胞株转染沉默slfn5基因,分为si-NC组,si-slfn5#1组、si-slfn5#2组.Transwell和细胞划痕实验比较各组细胞侵袭、迁移能力.Western blot法考察各组细胞SLFN5及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和Snail等EMT相关蛋白和Wnt/β-链环蛋白(β-catenin)信号通路关键蛋白β-catenin的相对表达量.结果 相比正常组织,卵巢癌组织slfn5 mRNA相对表达量明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).相比人卵巢表面上皮细胞IOSE80,SKOV3、OVCAR3和HD8910细胞系slfn5 mRNA均显著高表达,差异均有统计学意义(均P<0.01);其中SKOV3、OVCAR3表达量最高.Transwell迁移实验结果显示,相比si-NC组,si-slfn5#1组、si-slfn5#2组穿过基底膜的细胞数量比均减少,差异均有统计学意义(均P<0.01).Transell侵袭实验结果显示,相比si-NC组,si-slfn5#1组、si-slfn5#2组穿过基底膜的细胞数量比均减少,差异均有统计学差异(均P<0.01).si-slfn5#1组、si-slfn5#2组EMT相关蛋白Vimentin、Snail、N-cadherin相对表达量下降,E-cadherin上升,相比si-NC组,差异均有统计学意义(均P<0.01);si-slfn5#1组、si-slfn5#2组β-catenin相对表达量降低,相比si-NC组,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 slfn5基因在人卵巢癌细胞系中高表达,沉默slfn5基因降低了卵巢癌细胞系EMT相关蛋白的表达,并抑制细胞迁移和侵袭,其机制可能与调控β-catenin的表达有关.
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