网络药理学整合巨噬细胞差异基因揭示双氢杨梅树皮素改善急性肺损伤的作用机制及实验验证

目的 基于网络药理学和巨噬细胞差异表达基因探讨双氢杨梅树皮素改善急性肺损伤的作用机制及实验验证.方法 应用Cytoscape软件,通过PharmMapper服务器、GeneCards和OMIM数据库构建"化合物-靶点-通路"网络;利用STRING数据库构建靶点蛋白互作网络,推测核心靶点;使用Metascape数据库对核心靶点进行GO、KEGG富集分析.下载巨噬细胞芯片数据,利用GEO2R分析芯片数据的差异表达基因,DAVID平台进行差异基因KEGG通路富集.采用流式细胞术检测M1型和M2型巨噬细胞标志物F4/80、CD11b、CD86和CD206的表达;采用Western blot法检测肺组织中PI3K和Akt蛋白表达量.结果 筛选出102个双氢杨梅树皮素抗急性肺损伤的潜在靶点,主要富集在PI3K/Akt信号通路、JAK/STAT信号通路、雌激素信号通路等;分子对接结果显示双氢杨梅树皮素与MMP9和IGF1具有较好的结合活性.差异表达基因富集到PI3K-Akt、细胞因子-细胞因子-受体相互作用、趋化因子等炎症相关信号通路.流式细胞术实验证明,双氢杨梅树皮素能明显增加M2型巨噬细胞极化和降低M1/M2的比例,且明显降低肺组织中PI3K和Akt蛋白表达量.结论 通过网络药理学和动物实验证实双氢杨梅树皮素通过PI3K/Akt信号通路调节巨噬细胞极化改善急性肺损伤,为进一步阐明双氢杨梅树皮素改善ALI/ARDS的机制提供理论依据.