藏药二十五味松石丸抑制血管生成和上皮间充质转化改善四氯化碳-酒精诱导的大鼠肝纤维化研究

XU Xiang,HUANG Dan, LU Hua-guan, LIU Yan-tao, LIU Xin,XIE Xin,LEI Chang,ZHAO Hong-qing, LIU Jian-jun

Central South Pharmacy(2023)

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摘要
目的 研究二十五味松石丸是否通过抑制血管生成和上皮间充质转化改善四氯化碳(CCl4)-酒精诱导的大鼠肝纤维化模型.方法 SPF级健康雄性SD大鼠30只,随机分为正常组,模型组,二十五味松石丸低、中和高[88、176、352 mg/(kg·d)]剂量组,每组6只.采用50%CCl4橄榄油腹部皮下左右交替注射,同时以5%酒精饮料喂养建立肝纤维化模型;正常组皮下注射同体积橄榄油以蒸馏水喂养,持续8周,造模的同时按照分组灌胃相应的药物和0.4%羧甲基纤维素钠治疗.HE和Masson染色检测大鼠肝脏组织病理变化和胶原纤维增生;生化试剂盒测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),酶联免疫分析测定肿瘤坏死因子(TNF-α)、透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LA)水平;免疫组化检测血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达;免疫印迹法检测α-SMA、TGF-β1、E-cadherin和Vimentin蛋白表达.结果 与正常组相比,模型组大鼠肝组织病理损伤严重,胶原纤维明显增生;模型组中大鼠血清中ALT、AST活性明显升高,TNF-α含量明显增加,HA和LN含量明显升高;模型组大鼠肝组织内CD31、α-SMA、TGF-β1和Vimentin蛋白表达明显增加,E-cadherin蛋白表达明显降低.与模型组相比,二十五味松石丸各剂量组均能改善大鼠肝组织病理损伤、降低肝功能和肝纤维化指标,降低大鼠血清中TNF-α水平及肝组织内CD31、α-SMA、TGF-β1和Vimentin蛋白表达,增加E-cadherin蛋白表达.结论 二十五味松石丸可改善CCl4酒精复合因素诱导的大鼠肝纤维化,其作用可能与抑制血管新生和上皮间充质转化相关.
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关键词
Ershiwuwei Songshi pill,liver fibrosis,angiogenesis,epithelial mesenchymal transformation,platelet endothelial cell adhesion molecule-1
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