白藜芦醇通过调节铁死亡通路抑制小鼠溃疡性结肠炎相关性结肠癌实验研究

目的:观察白藜芦醇(Res)是否可通过调节铁死亡通路抑制小鼠溃疡性结肠炎相关性结肠癌(UCACC).方法:①将28只C57BL/6小鼠随机分为Control组、氧化偶氮甲烷(AOM)组、AOM+葡聚糖硫酸钠盐(DSS)组、AOM+DSS+Res组.造模实验周期为70 d.AOM组、AOM+DSS组和AOM+DSS+Res组第1天注射1次AOM.从造模第2周开始AOM+DSS组和AOM+DSS+Res组饮用含DSS水,第3周更换为无菌水,第4周换为含DSS水,以此循环到造模实验周期结束.Control组和AOM组饮用无菌水,AOM+DSS+Res组每周给予Res灌胃.造模结束后处死小鼠,取小鼠结肠组织,HE染色后观察小鼠结肠组织病理改变.分别采用免疫组织化学法(IHC)和Western blot检测小鼠结肠组织谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、铁蛋白重链(FTH)、P53蛋白的表达.②将人结肠癌HCT 116细胞分为空白对照组及4、8、16μg/ml Res组.用不同浓度(4、8、16μg/ml)Res处理HCT 116细胞.收集处理的细胞后,采用CCK-8实验检测细胞增殖活性,采用Western blot检测细胞GPX4、ACSL4、FTH蛋白的表达.结果:①HE染色结果显示小鼠UCACC模型建模成功,Res可明显抑制AOM+DSS诱导的小鼠UCACC形成.IHC染色结果显示,与Control组比较,AOM组FTH蛋白表达下降;AOM+DSS组GPX4和FTH蛋白表达明显上升,ACSL4和P53蛋白表达明显下降(均P<0.05).与AOM+DSS组比较,AOM+DSS+Res组GPX4和FTH蛋白表达下降,ACSL4和P53蛋白表达明显上升(均P<0.05).Western blot检测结果显示,与Control组比较,AOM组GPX4、FTH蛋白表达下降,ACSL4表达上升;AOM+DSS组GPX4和FTH蛋白表达上升,ACSL4和P53蛋白表达下降(均P<0.05).与AOM+DSS组比较,AOM+DSS+Res组GPX4和FTH蛋白表达下降,ACSL4和P53蛋白表达上升(均P<0.05).②CCK-8实验结果显示,8、16μg/ml Res组细胞存活率低于空白对照组(均P<0.05).Western blot检测结果显示,与空白对照组比较,4、8、16μg/ml Res组细胞GPX4和FTH蛋白表达下降,ACSL4蛋白表达上升(均P<0.05).结论:Res可以通过调控细胞铁死亡通路抑制UCACC.