补肾活血法调控PI3K/AKT/mTOR通路修复卵巢颗粒细胞自噬损伤机制研究

目的:观察补肾活血法调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞(OGCs)自噬损伤的影响.方法:将原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞分为六组:空白对照组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、果纳芬组.采用ELISA法检测各组中雌二醇(E2)、孕酮(P)分泌量;Western blot法和免疫荧光法分别检测各组OGCs中PI3K、AKT、mTOR及自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin 1)、微管相关蛋1轻链3(LC3)、自噬受体蛋白p62的蛋白表达.结果:模型组E2含量显著降低,中药各剂量组E2含量均上升(均P＜0.05),且中药高剂量组与果纳芬组E2含量相当;各组对P的含量均没有影响(均P＞0.05).中药各剂量组及果纳芬组p-PI3K、p-AKT、p-mTOR水平和p62的表达上调,Beclin 1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达下调,且中药高剂量组效果优于果纳芬组(均P＜0.05).结论:补肾活血中药复方新加归肾丸可能是通过激活PI3K/AKT/mTOR通路,下调下游自噬效应分子Beclin 1及LC3的表达并减少p62的消耗来修复OGCs的自噬损伤.