致病性猪圆环病毒基因分型三重荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种同时鉴别致病性猪圆环病毒(PCV)不同型的检测方法,本研究对PCV2、PCV3、PCV4各自Rep基因进行特异性保守序列分析,建立了致病性PCV的TaqMan单重和三重荧光定量PCR检测方法.该方法能特异性区分PCV2、PCV3和PCV4,与PCV1及PRV等临床上常见的猪传染性病原均无交叉反应.建立的单重及三重PCR方法的最低检测限度均为101copies/μL,组内及组间的变异系数均小于1％,表明重复性良好.对354份猪临床组织病料进行三重荧光定量PCR检测,结果显示,PCV2、PCV3和PCV4的阳性率分别为66.7％、26.8％和0;PCV2和PCV3共感染率为15.8％.结果表明,本研究建立的三重荧光定量PCR方法能准确鉴别致病性PCV,灵敏性优于普通PCR法,检测过程更高效、便捷,为致病性PCV的临床诊断及流行病学调查提供了检测工具.